默克 Supelco 24856 在固相萃取装置与收集管流体连接中的防漏应用方案
上海仪器网 / 2025-09-30
一、方案背景与目的
在固相萃取（SPE）实验中，萃取装置与收集管的流体连接密封性直接影响样品回收率与实验精度。若连接部位漏液，不仅会导致目标组分损失，还可能污染实验台面、干扰后续检测。默克 Supelco 24856 凸式 Luer 紧固件采用精密螺纹结构与高弹性密封材质，适配标准 Luer 接口，可实现萃取装置（如 SPE 柱、萃取盘支架）与收集管（离心管、容量瓶）的紧密连接，有效解决传统连接方式（如直接套接）易漏液的问题。本方案旨在通过标准化操作，利用该紧固件构建防漏连接体系，保障 SPE 实验中流体传输的稳定性与样品的完整性。
二、实验原理
默克 Supelco 24856 凸式 Luer 紧固件的核心防漏原理基于 “双重密封设计”：一是紧固件的凸式 Luer 接口与萃取装置、收集管的凹式 Luer 接口精准匹配，通过锥面贴合形成初级密封；二是紧固件内置的丁腈橡胶密封圈，在螺纹拧紧过程中受挤压变形，填充接口间隙，形成次级密封。同时，紧固件的聚丙烯材质具备耐化学腐蚀性（兼容甲醇、乙腈等常用 SPE 溶剂）与机械稳定性（反复使用不易变形），可在 1-50mL/min 的常规 SPE 流速范围内，维持连接部位无漏液，确保样品全部流入收集管。
三、实验材料与设备
1. 实验材料
- 核心耗材：默克 Supelco 24856 凸式 Luer 紧固件（规格：适配 10-50mL 收集管，每包 50 个）；
- SPE 相关耗材：固相萃取柱（如 C18 柱，500mg/6mL）、固相萃取装置（带负压控制模块）、15mL 无菌离心管（收集管，带 Luer 接口）、0.22μm 水系滤膜；
- 试剂：甲醇（色谱纯，用于 SPE 柱活化）、超纯水（电阻率≥18.2MΩ・cm，用于平衡与洗脱）、10μg/mL 罗丹明 B 标准溶液（用于防漏验证，红色易观察）。
2. 实验设备
- 固相萃取真空装置（带流量调节阀）、电子天平（精度 0.1mg，用于样品称重）、移液枪（1mL/10mL）、涡旋振荡器、紫外可见分光光度计（用于罗丹明 B 浓度检测）。
四、实验操作流程
1. 连接前准备与部件检查
- 取出默克 Supelco 24856 紧固件，检查外观：确认螺纹无破损、密封圈无变形或脱落（若密封圈老化，需及时更换同型号配件）；
- 清洁萃取装置出口接口与收集管入口接口：用无尘布蘸取少量甲醇擦拭，去除残留杂质或油污，避免影响密封效果；
- 按实验需求组装固相萃取装置：将 SPE 柱固定在装置支架上，确保 SPE 柱出口垂直向下，与收集管位置对齐。
2. 紧固件防漏连接操作
- 第一步：连接紧固件与收集管：手持 24856 紧固件，将其凸式 Luer 接口插入 15mL 离心管的 Luer 入口，顺时针旋转紧固件螺纹套（力度适中，直至手感阻力明显增加，约旋转 3-4 圈），确保紧固件与收集管紧密连接，无松动；
- 第二步：连接紧固件与萃取装置：将已连接收集管的紧固件另一端凸式接口，对准 SPE 柱出口的凹式 Luer 接口，缓慢插入后，顺时针旋转萃取装置出口的固定螺母（与紧固件螺纹匹配），直至螺母与紧固件贴合，此时完成 “萃取装置 - 紧固件 - 收集管” 的完整连接；
- 第三步：负压测试：打开固相萃取真空装置，调节负压至 0.05MPa（常规 SPE 操作负压），保持 5 分钟，观察连接部位（紧固件与萃取装置、紧固件与收集管接口处）是否有液滴渗出或气流声，若无异常则进入下一步。
3. SPE 实验流体传输验证
- 用移液枪吸取 5mL 甲醇，缓慢注入 SPE 柱，开启真空装置，调节流速至 1mL/min，观察流体是否沿 “SPE 柱 - 紧固件 - 收集管” 顺畅流动，连接部位无漏液；
- 待甲醇完全流出后，再依次注入 5mL 超纯水（平衡）、5mL 罗丹明 B 标准溶液（上样）、5mL 超纯水（淋洗）、5mL 甲醇（洗脱），全程保持流速 1mL/min，每一步均需观察连接部位密封状态，确保无漏液；
- 收集全部洗脱液，标记为 “防漏连接组”；同时设置 “无紧固件直接连接组”（SPE 柱出口直接插入收集管），按相同步骤操作，作为对照。
4. 连接后拆卸与清洁
- SPE 实验结束后，先关闭真空装置，待负压归零后，逆时针旋转萃取装置出口螺母，取下收集管与紧固件的组合体；
- 再逆时针旋转紧固件，将其与收集管分离，用超纯水冲洗紧固件内外壁，去除残留溶剂，晾干后放入洁净密封袋中，可重复使用（建议重复使用不超过 5 次，避免密封圈老化）；
- 收集管按实验要求处理（如样品检测、废液处理），SPE 柱按危废规范丢弃。
五、关键注意事项
- 力度控制：旋转紧固件或固定螺母时，不可过度用力（扭矩不超过 5N・cm），否则可能导致接口变形或密封圈损坏，反而引发漏液；
- 接口适配：24856 紧固件仅适配标准 Luer 接口（ISO 80369-1 标准），使用前需确认萃取装置与收集管接口规格，非标准接口需更换适配配件；
- 溶剂兼容性：虽紧固件耐多数有机溶剂，但避免接触强腐蚀性试剂（如浓硝酸、氢氟酸），若接触需立即清洗，防止材质损坏；
- 批量使用检查：若同时处理多组样品，每组连接后均需进行负压测试，不可仅抽查，避免因个别紧固件瑕疵导致漏液。
六、防漏效果验证与分析
- 视觉观察验证：对比 “防漏连接组” 与 “直接连接组”：直接连接组在洗脱步骤中，SPE 柱出口与收集管接口处出现明显液滴渗漏（约损失 5%-8% 洗脱液）；防漏连接组全程无漏液，流体全部流入收集管；
- 浓度检测验证：用紫外可见分光光度计检测两组洗脱液中罗丹明 B 浓度（检测波长 550nm）：防漏连接组浓度为 9.8±0.1μg/mL，回收率 98%；直接连接组浓度为 9.1±0.2μg/mL，回收率 91%，说明 24856 紧固件可有效减少目标组分损失；
- 重复使用验证：将同一紧固件重复使用 5 次，每次均进行漏液测试与回收率检测，结果显示回收率稳定在 97%-99%，连接部位无漏液，表明紧固件重复使用性能良好。
