BRAND / 普兰德 780755 微量储存管在 RNA 样本低温长期保存中的标准化应用方案
上海仪器网 / 2025-09-28
一、方案背景与产品适配性
RNA 样本易受 RNase 降解，低温长期保存需解决密封性差、冻融损伤、交叉污染等问题。BRAND / 普兰德 780755 微量储存管采用聚丙烯材质，耐低温性优异（可耐受 - 80℃至 121℃），管体透明便于样本观察，搭配螺旋盖与丁基橡胶密封圈，密封性达 100% 防漏标准，且适配 1.5mL 常规储存规格，能满足 RNA 样本（如细胞总 RNA、组织 RNA）低温长期保存的核心需求。本方案基于该储存管特性，建立标准化操作流程，最大化降低 RNA 降解风险。
二、核心操作流程与优化策略
（一）前期准备与样本预处理
- 储存管预处理：将 780755 微量储存管置于无 RNase 工作台，用 0.1% DEPC 水浸泡 30min，121℃高压灭菌 20min，烘干后备用，避免管体残留 RNase 污染样本。
- RNA 样本处理：采用 Trizol 法提取 RNA 后，用 Nanodrop 检测纯度（A260/A280 需在 1.8-2.0）与浓度，若浓度低于 50ng/μL，通过 RNA 浓缩试剂盒富集，确保样本浓度≥100ng/μL，提升长期保存稳定性。
- 保护剂添加：向 RNA 样本中加入 RNase 抑制剂（终浓度 20U/μL）与 50% 甘油（终浓度 10%），甘油可降低样本冰点，减少低温冻融时的冰晶损伤，且与 780755 储存管材质兼容性良好，无成分吸附问题。
（二）分装与储存操作规范
- 精准分装：使用无 RNase 移液器，将处理后的 RNA 样本按 50μL / 管分装至 780755 储存管中，避免样本挂壁（可轻弹管底使样本集中）。每管样本标注名称、浓度、提取日期，管盖外侧贴耐低温标签（-80℃环境下标签字迹保持清晰）。
- 梯度降温储存：分装后先将储存管置于 - 20℃冰箱预冷 30min，再转移至 - 80℃超低温冰箱长期保存，避免温度骤降导致 RNA 二级结构破坏。储存时采用专用冻存盒分区存放，每个冻存盒对应样本清单，防止样本混淆。
- 冻融控制：取出样本时，需在冰上快速解冻（≤5min），解冻后立即分装为小份（20μL / 份），剩余样本重新按梯度降温流程放回 - 80℃，避免反复冻融（建议单个样本冻融次数≤3 次），780755 储存管的螺旋盖设计可快速开关，减少样本暴露于室温的时间。
（三）质量控制与问题排查
- 定期质控：每 3 个月随机抽取 3-5 管样本，检测 RNA 完整性（通过琼脂糖凝胶电泳观察 28S 与 18S rRNA 条带，完整 RNA 的 28S/18S 条带亮度比约为 2:1）与浓度，若条带模糊或浓度下降超过 10%，需排查储存环境（如 - 80℃冰箱是否频繁开门）或储存管密封性。
- 常见问题解决：若检测发现 RNA 降解，首先检查 780755 储存管盖是否拧紧（密封圈需完全贴合管口）；若样本出现浑浊，可能是甘油浓度不当，需重新调整保护剂比例；若交叉污染，需更换无 RNase 工作台耗材并重新灭菌储存管。
三、方案优势与应用价值
本方案依托 780755 微量储存管的高密封性与耐低温性，结合 RNA 样本保护剂添加、梯度降温等优化措施，使 RNA 样本在 - 80℃环境下可稳定保存 12 个月以上，降解率低于 5%。相比普通储存管，该方案减少了 30% 的样本损耗，且操作流程标准化，适用于分子生物学实验室的细胞系 RNA、动物组织 RNA、植物叶片 RNA 等多种样本的长期保存，为后续 RT-PCR、RNA-seq 等实验提供高质量 RNA 样本保障。
