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智能细胞粉碎机SCIENTZ-950E在不同生物样本高效破碎中的应用及效能评估
上海仪器网 / 2025-11-21

 

一、方案背景与需求分析

在分子生物学、微生物学、免疫学及生物制药等领域,生物样本的高效、彻底破碎是后续核酸提取、蛋白纯化、代谢物分析等实验的关键前置步骤。传统细胞破碎设备普遍存在破碎效率低、样本间差异大、操作繁琐、温控精度不足等问题,尤其对于高难度破碎样本(如真菌孢子、革兰氏阳性菌)或微量珍贵样本,难以兼顾破碎效果与样本活性保留。
智能细胞粉碎机SCIENTZ-950E基于超声波破碎原理,结合智能控制系统与精准温控技术,旨在解决传统设备的痛点。本方案针对细菌、真菌、动物组织、植物组织4类典型生物样本,系统探究SCIENTZ-950E的最优破碎参数,量化评估其破碎效能及对后续实验的影响,为生物实验室样本前处理提供标准化解决方案。

二、方案核心设备:智能细胞粉碎机SCIENTZ-950E特性

SCIENTZ-950E作为一款智能型细胞破碎设备,其核心特性为破碎效能与样本保护提供了技术支撑,主要参数与功能如下:
  • 超声功率调节:0-950W连续可调,支持脉冲模式(脉冲时间1-99s,间隔时间1-99s),适配不同硬度样本;
  • 温控系统:内置高精度温度传感器(精度±0.5℃),实时监测样本温度,当温度超过设定阈值(可设范围0-60℃)时自动降低功率或暂停工作,避免高温导致样本变性;
  • 智能程序存储:可预设10组破碎程序,支持一键调用,减少操作误差;
  • 样本适配范围:适配0.5-50mL样本,配备不同规格超声探头(6mm、10mm、15mm),满足微量与大量样本需求;
  • 安全保护:具备过流、过温、空载保护功能,保障实验安全与设备寿命。

三、实验设计与方法

3.1 实验样本

选取4类实验室常用生物样本,均为对数生长期或新鲜制备样本,具体如下:
  1. 革兰氏阴性菌:大肠杆菌(E. coli DH5α),OD600=1.0,菌液浓度约1×10^9 CFU/mL;
  2. 革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),OD600=0.8,菌液浓度约8×10^8 CFU/mL;
  3. 真菌:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),菌液浓度约5×10^7 CFU/mL;
  4. 动物组织:小鼠肝脏组织,新鲜制备成10%(w/v)组织匀浆;
  5. 植物组织:菠菜叶片,新鲜制备成5%(w/v)组织匀浆。

3.2 实验分组与参数设置

以“破碎效率”“样本活性保留率”为核心评价指标,设置不同超声功率、破碎时间、脉冲参数,通过预实验筛选各样本的最优参数范围,最终确定实验组参数如下,同时以传统超声破碎仪(SCIENTZ-650,非智能型)作为对照组。
样本类型
SCIENTZ-950E参数(最优)
对照组参数(SCIENTZ-650)
大肠杆菌
功率300W,脉冲3s/间隔2s,时间3min,温控25℃
功率300W,连续破碎3min,无温控
金黄色葡萄球菌
功率500W,脉冲5s/间隔3s,时间5min,温控20℃
功率500W,连续破碎5min,无温控
酿酒酵母
功率600W,脉冲4s/间隔2s,时间4min,温控18℃
功率600W,连续破碎4min,无温控
小鼠肝脏组织
功率400W,脉冲2s/间隔1s,时间2min,温控4℃
功率400W,连续破碎2min,无温控
菠菜叶片组织
功率450W,脉冲3s/间隔2s,时间3min,温控25℃
功率450W,连续破碎3min,无温控

3.3 检测指标与方法

  1. 破碎效率: 细菌/真菌:采用平板计数法,计算破碎后存活菌数占初始菌数的比例,破碎效率=(1-存活菌比例)×100%;
  2. 组织样本:采用考马斯亮蓝法测定破碎后上清液中总蛋白浓度,以蛋白溶出量反映破碎效率,同时通过显微镜观察组织细胞破碎完整性。
  3. 样本活性保留率: 蛋白活性:以乳酸脱氢酶(LDH)为指示酶,测定破碎后上清液中LDH活性,与标准活性相比计算保留率;
  4. 核酸完整性:提取破碎样本中的总DNA,通过琼脂糖凝胶电泳观察DNA条带清晰度,以无明显降解为活性保留合格标准。
  5. 温度变化:实时记录实验过程中样本温度变化,对比两组设备的温控效果。

四、实验结果与分析

4.1 不同样本的破碎效率对比

SCIENTZ-950E对5类生物样本均表现出优异的破碎效率,且显著高于传统对照组,具体结果如下表所示:
样本类型
SCIENTZ-950E破碎效率
对照组破碎效率
效率提升幅度
大肠杆菌
99.2±0.3%
92.5±1.2%
7.2%
金黄色葡萄球菌
98.5±0.5%
85.3±2.1%
15.5%
酿酒酵母
97.8±0.4%
88.1±1.5%
11.0%
小鼠肝脏组织
上清蛋白浓度12.8±0.6 mg/mL
上清蛋白浓度8.3±0.4 mg/mL
54.2%
菠菜叶片组织
上清蛋白浓度6.5±0.3 mg/mL
上清蛋白浓度3.7±0.2 mg/mL
75.7%
分析可知,SCIENTZ-950E对结构坚韧的革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)和真菌(酿酒酵母)的破碎效率提升尤为显著,这得益于其脉冲破碎模式——脉冲间隔可避免局部能量过度集中导致的探头空化效应,同时让样本充分接触超声场,提升破碎均匀性。对于植物组织这类含有细胞壁和纤维结构的样本,其高效破碎效果则与精准的功率调节和温控保护相关,避免了组织蛋白因高温凝固而影响溶出。

4.2 样本活性保留率结果

样本活性保留是衡量细胞破碎设备性能的关键指标,尤其对后续蛋白纯化和酶活分析至关重要。实验结果显示,SCIENTZ-950E的温控系统有效保障了样本活性,具体数据如下:
  1. 蛋白活性保留:以小鼠肝脏组织中的LDH活性为指标,SCIENTZ-950E组LDH活性保留率为92.3±1.8%,而对照组因破碎过程中样本温度从初始4℃升至38℃,LDH活性保留率仅为65.7±2.5%,差异极显著(P<0.01)。对于大肠杆菌破碎后的胞内酶(β-半乳糖苷酶),SCIENTZ-950E组活性保留率为88.5±2.1%,对照组为70.2±3.0%,进一步证明其温控系统的有效性。
  2. 核酸完整性:提取5类样本破碎后的总DNA,琼脂糖凝胶电泳结果显示,SCIENTZ-950E组所有样本的DNA条带清晰、无拖尾,表明DNA未发生降解;而对照组中金黄色葡萄球菌、菠菜叶片组织的DNA条带出现明显拖尾,提示高温和过度破碎导致核酸断裂。

4.3 温度变化对比

实验过程中样本温度变化直接反映设备的温控能力。SCIENTZ-950E组所有样本的温度波动均控制在设定阈值±1℃范围内,例如小鼠肝脏组织破碎过程中温度始终维持在4-5℃,菠菜叶片组织温度稳定在25-26℃;而对照组所有样本均出现明显升温,其中金黄色葡萄球菌破碎5min后温度升至42℃,酿酒酵母破碎4min后温度升至35℃,远超生物样本活性耐受范围(一般为0-25℃)。这一结果表明,其内置的温度传感器和智能功率调节系统形成了闭环控制,当温度接近阈值时,设备自动降低超声功率或延长脉冲间隔,从源头避免了热损伤。

五、方案优势与应用建议

5.1 方案核心优势

  • 高效性与通用性:适配细菌、真菌、动植物组织等多种样本,破碎效率较传统设备提升7.2%-75.7%,尤其适用于高难度破碎样本;
  • 智能与精准:预设程序减少操作误差,脉冲模式和功率调节实现破碎参数个性化匹配,温控精度±0.5℃保障样本活性;
  • 安全与稳定:过流、过温、空载保护功能降低实验风险,设备连续运行8h无故障,满足批量样本处理需求。

5.2 应用场景建议

  1. 分子生物学实验室:用于基因组DNA提取、RNA提取及胞内蛋白纯化的样本前处理,尤其适合微量珍贵样本(如临床活检组织);
  2. 微生物学研究:针对耐药菌、极端环境微生物等难破碎菌株的破碎,为代谢组学和蛋白组学分析提供高质量样本;
  3. 生物制药领域:用于疫苗生产中病毒载体破碎、重组蛋白表达工程菌的胞内产物提取,保障产物活性和纯度;
  4. 农业与食品检测:用于植物病原菌检测、食品微生物快速检测中的样本破碎,提升检测灵敏度。

 

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