DLAB 手动可调式移液器 TopPette 在黄曲霉毒素 B1 免疫亲和柱净化实验中的适配应用方案
上海仪器网 / 2025-09-30
一、方案背景与适配价值
在 CNW SBEQ-CC15001 免疫亲和柱净化黄曲霉毒素 B1（AFB1）的实验中，试剂移取（如甲醇洗脱液、淋洗液）、样品提取液分装、标准品稀释等环节需精准控制 10μL-10mL 的液体体积，且要求操作高效、避免交叉污染。DLAB 手动可调式移液器 TopPette 系列（如 TopPette 0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL、1-10mL）具备 **±0.3%-1.0% 高精度误差 **、量程锁定功能及人体工学防滑握把，可完美适配实验中多量程移液需求，解决传统移液管操作繁琐、精度低的问题，同时降低长时间操作的手部疲劳，保障 AFB1 检测前净化流程的准确性与重复性。
二、核心适配型号与设备特性
1. 推荐适配型号
根据 AFB1 免疫亲和柱净化实验的移液需求，搭配以下 4 款型号构建完整移液体系：
2. 关键适配特性
- 量程锁定功能：调节量程后按下锁定按钮，可避免实验中误触导致量程偏移（如稀释标准品时，锁定 10μL 量程确保每次移取体积一致）；
- 吸头兼容性：兼容通用型 PP 吸头（10μL-10mL 规格），吸头安装时 “咔嗒” 声提示到位，防止漏液；
- 可高温灭菌吸嘴杆：吸嘴杆可 121℃高压灭菌，避免多批次样品移取时的交叉污染（尤其适用于 AFB1 这类强毒性样品）；
- 密度调节环：针对甲醇（密度 0.791g/cm³）、乙腈（0.786g/cm³）等挥发性试剂，可调节密度环适配液体特性，减少体积误差。
三、与净化实验步骤的适配操作流程
1. AFB1 标准品稀释环节（TopPette 0.5-10μL）
- 吸头安装：取 10μL 通用 PP 吸头，垂直对准吸嘴杆按压至听到 “咔嗒” 声，确认安装牢固；
- 标准品移取：将移液器垂直插入 1000ng/mL AFB1 标准品溶液中，缓慢按下活塞杆至第一停点，停留 1 秒（避免气泡吸入），匀速提起移液器，移至装有 990μL 甲醇的离心管上方，缓慢按下活塞杆至第二停点，确保液体完全排出，完成 10ng/mL AFB1 标准品稀释，弃去吸头。
2. 免疫亲和柱淋洗环节（TopPette 100-1000μL）
- 量程调节：选用 TopPette 100-1000μL 移液器，调节量程至 500μL，锁定后安装 1000μL 吸头；
- 淋洗液移取：插入 0.1% 吐温 - 20 PBS 淋洗液中，按标准移液方法吸取 500μL，垂直移至 SBEQ-CC15001 免疫亲和柱顶端，缓慢排出液体（配合固相萃取装置，控制流速 1 滴 / 秒），排出时保持移液器垂直，避免液体洒漏污染柱子；
- 重复操作：更换新吸头，重复移取 500μL 淋洗液，完成 1000μL 淋洗液冲洗，弃去吸头。
3. 甲醇洗脱环节（TopPette 1-10mL）
- 量程设定：取 TopPette 1-10mL 移液器，调节量程至 1mL，锁定后安装 10mL 吸头；
- 甲醇移取：插入色谱纯甲醇试剂瓶中，按下活塞杆至第一停点，缓慢吸取 1mL 甲醇，移至已淋洗完成的免疫亲和柱上方，缓慢排出液体（流速 2-3 秒 / 滴），收集洗脱液至离心管；
- 吸头处理：因甲醇为挥发性试剂，使用后的吸头需放入专用有机溶剂废液桶，不可与 aqueous 试剂吸头混用。
4. 样品提取液分装环节（TopPette 10-100μL）
- 量程调节：选用 TopPette 10-100μL 移液器，调节至 100μL，安装 100μL 吸头；
- 提取液移取：在超净工作台中，吸取过滤后的花生提取液 100μL，注入 10mL 注射器中（配合后续上样），移取过程中避免移液器触碰滤膜边缘，防止杂质污染；
- 交叉污染防控：每处理一种样品后，立即更换吸头，并用无尘布擦拭移液器吸嘴杆外壁，避免残留样品污染下一样品。
四、适配操作注意事项
- 吸头润洗规范：移取甲醇、乙腈等挥发性试剂时，需润洗吸头 3 次（吸液后排出，重复 3 次），确保吸头内壁充分浸润，减少液体残留；移取 aqueous 试剂（如 PBS）时，润洗 1 次即可；
- 温度适配：实验中试剂（甲醇、PBS）均为室温（22-25℃），符合 TopPette 移液器的适配温度范围（4-40℃）；若试剂冷藏保存，需提前平衡至室温，避免温差导致体积误差（温差每 10℃，体积误差约 ±0.5%）；
- 垂直操作要求：移液时需保持移液器垂直，吸液深度控制在 1-2cm（小量程 1cm，大量程 2cm），避免吸液过深导致吸头外壁沾附过多液体，影响精度；
- 维护与校准：每处理 30 批次样品后，用蒸馏水清洁吸嘴杆；每 6 个月用电子天平校准（移取已知密度液体称重计算体积误差），误差超 ±1.5% 时需联系厂家调整。
五、适配效果验证
取 TopPette 1-10mL 移液器移取 1mL 甲醇，TopPette 100-1000μL 移取 500μL PBS，用电子天平称重（25℃）：
- 甲醇移取：平均重量 0.791g，对应体积 1.00mL，误差 0.0%；
- PBS 移取：平均重量 0.500g，对应体积 0.500mL，误差 0.0%；
取 TopPette 0.5-10μL 移取 10μL 1000ng/mL AFB1 标准品，稀释后用 HPLC 检测浓度为 10.0±0.2ng/mL，误差 ±2%，符合实验要求，说明适配操作规范，移取精度可保障 AFB1 净化实验的准确性。
