美国 3M ATP 荧光检测仪 LM1 样品采集与拭子使用规范操作手册
上海仪器网 / 2025-09-17
美国 3M ATP 荧光检测仪 LM1 通过检测生物组织中的 ATP 含量（以 RLU 值，即相对光单位表示），快速判断表面洁净度，广泛应用于食品加工、医疗、餐饮等领域。其检测结果的准确性高度依赖 “样品采集的代表性” 与 “拭子操作的规范性”，若存在拭子选择不当、采样手法错误等问题，易导致 RLU 值偏差，出现 “假阴性”（漏检污染）或 “假阳性”（误判污染）。本手册针对样品采集与拭子使用的全流程，明确操作规范与关键控制点。
一、操作前准备
（一）人员与环境准备
- 人员防护：操作人员需穿戴一次性无菌手套（无粉型，避免手套粉末中的 ATP 干扰检测）、口罩，若采样对象为食品接触表面（如烘焙烤盘），需额外穿戴无菌工作服与鞋套，防止人员自身携带的微生物污染采样表面。
- 环境控制：采样环境需避免强光直射（如阳光、紫外线灯）—— 强光会分解 ATP，导致 RLU 值偏低；同时禁止在通风口下方采样（避免气流带走表面的微生物或 ATP 残留），环境温度需控制在 15℃-30℃（超出该范围会影响拭子中反应试剂的活性）。
（二）器材准备
- 拭子选择：必须使用 3M 专用 ATP 检测拭子（如 3M Clean-Trace Surface Swab，货号 ATP100），禁止使用非专用拭子 —— 专用拭子预装有裂解液与荧光素酶试剂，且拭子头材质为聚酯纤维（吸附 ATP 效率达 90% 以上，远超普通棉拭子的 60%），可确保 ATP 充分捕获与反应。
- 仪器与耗材检查：确认 LM1 检测仪已完成预热（开机后需预热 5 分钟，屏幕显示 “READY”）；检查拭子包装是否完好（无破损、漏气），且在有效期内（拭子开封后需 30 分钟内使用，避免试剂受潮失效）；准备无菌生理盐水（用于湿润干燥表面，如不锈钢设备表面）、无菌标签（用于标记样品信息）、采样记录单（记录采样时间、地点、表面类型）。
二、拭子使用与样品采集规范流程
（一）拭子开封与活化
- 无菌开封：用手捏住拭子包装的 “撕口处”，沿水平方向缓慢撕开（禁止用剪刀剪开，避免剪刀污染拭子头），取出拭子 —— 注意仅触碰拭子杆的末端（非采样端），禁止接触拭子头或杆体中部。
- 干燥表面湿润处理：若采样表面为干燥状态（如烤箱内壁、医疗设备台面），需用无菌移液器吸取 0.5mL 无菌生理盐水，滴在拭子头处（确保拭子头湿润但不滴水）；若为湿润表面（如水槽内壁、餐具表面），可直接使用干燥拭子，无需额外湿润（避免过多水分稀释试剂）。
（二）采样操作（分表面类型）
1. 平面采样（如桌面、设备台面）
- 划定采样区域：用无菌记号笔在目标表面划定 10cm×10cm 的正方形区域（若表面面积不足，可按实际面积采样，需在记录单注明），确保采样区域无明显污渍、划痕（污渍会遮挡 ATP，导致漏检）。
- 擦拭手法：将拭子头紧贴表面，以 “Z” 字形轨迹擦拭划定区域 —— 横向擦拭 5 次，纵向擦拭 5 次，擦拭力度以拭子头轻微变形为宜（力度过轻无法充分接触表面，过重易导致拭子头脱落）；擦拭过程中需确保拭子头始终在划定区域内，避免超出范围导致样品污染。
2. 曲面 / 缝隙采样（如管道接口、门把手）
- 曲面采样：对于圆柱形表面（如门把手），将拭子头围绕表面旋转擦拭 3 圈，同时沿轴向移动拭子（移动距离约 5cm），确保拭子头与曲面全方位接触；对于不规则曲面（如管道接口），用拭子头反复擦拭缝隙处（重点关注凹陷部位，此类区域易残留 ATP）。
- 缝隙采样：若表面存在缝隙（宽度≤2mm，如设备接缝处），将拭子头折叠成 “V” 形，插入缝隙中，缓慢往返擦拭 4 次，避免用力过猛导致拭子头卡在缝隙中。
（三）拭子处理与检测准备
- 试剂混合：采样完成后，将拭子头插回原包装的试剂管中（确保拭子头完全浸入试剂液中），用手捏住试剂管中部，上下颠倒 5 次（每次颠倒需停留 2 秒，使 ATP 与裂解液充分反应，释放核酸），随后静置 1 分钟（让荧光素酶与 ATP 反应生成荧光）。
- 样品标记与记录：在试剂管上粘贴无菌标签，标注 “采样日期 - 时间 - 地点 - 表面类型”（如 “20240520-0930 - 食品车间 - 烤盘”），同时在采样记录单上同步记录，避免样品混淆。
三、质量控制与注意事项
（一）空白对照与阳性对照
- 空白对照：每批次采样需设置 1 个空白对照 —— 取 1 支未采样的专用拭子，按 “开封 - 活化 - 试剂混合” 流程处理后，放入 LM1 检测仪检测，RLU 值需≤10（若超过 10，说明拭子污染或操作环境存在干扰，需重新采样）。
- 阳性对照：每周需进行 1 次阳性对照验证 —— 用已知 ATP 浓度的标准品（如 3M Clean-Trace Positive Control，RLU 值约 5000）涂抹在无菌表面，按正常流程采样检测，检测结果需在标准品 RLU 值的 ±10% 范围内（若偏差过大，需校准 LM1 检测仪或更换拭子批次）。
（二）常见操作误区与规避
- 避免交叉污染：每采集 1 个样品需更换 1 副手套与 1 支拭子，禁止用同一拭子采样多个表面；采样工具（如记号笔、移液器）需定期用 75% 酒精消毒，避免工具携带的 ATP 污染采样表面。
- 拭子处理时限：采样完成后需在 10 分钟内将拭子放入 LM1 检测仪检测（ATP 在室温下易降解，超过 10 分钟 RLU 值会下降 15%-20%），禁止长时间放置。
- 异常情况处理：若采样过程中拭子头脱落，需立即停止采样，用无菌镊子移除脱落的拭子头，更换新拭子重新采样，并在记录单注明 “拭子脱落，重新采样”；若检测 RLU 值异常偏高（如远超该表面常规值），需重复采样 1 次，确认是否为偶发污染。
四、拭子废弃物处理
采样完成后的拭子（包括未使用但已开封的拭子）需放入医疗废物专用垃圾袋（黄色），按《医疗废物管理条例》进行无害化处理（禁止与生活垃圾混放）；试剂管中的残留液体含荧光素酶等生物试剂，需密封后再丢弃，避免试剂泄漏污染环境。
通过严格遵循本手册的样品采集与拭子使用规范，可确保美国 3M ATP 荧光检测仪 LM1 的检测结果真实、可靠，为食品卫生、医疗洁净度管控提供精准的数据支撑。
